Eiwitconcentratie Rekenmachine

Categorie: Biologie
- April 03, 2025
| |
Typische waarden liggen tussen 0.5 en 2.0
Standaard cuvetten hebben een padlengte van 1 cm
Als het monster vóór de meting is verdund (bijv. 5 = 1:5 verdunning)

De concentratie van eiwit met behulp van absorptie bij 280 nm (A280) wordt bepaald met de Beer-Lambert Wet:

\[ C = \frac{A}{\epsilon \times l} \]

waarbij:

  • \( C \) = Eiwitconcentratie (mg/mL)
  • \( A \) = Absorptie bij 280 nm
  • \( \epsilon \) = Extinctiecoëfficiënt (L·g⁻¹·cm⁻¹)
  • \( l \) = Padlengte van de cuvet (cm)

Wat is de Eiwitconcentratie Calculator?

De Eiwitconcentratie Calculator helpt bij het bepalen van de eiwitconcentratie met verschillende methoden, waaronder:

  • Absorptie bij 280 nm (A280): Een snelle en niet-destructieve methode gebaseerd op aromatische aminozuren.
  • Bradford Assay: Een kleurimetrische methode die gebruikmaakt van kleurstofbinding.
  • BCA (Bicinchoninezuur) Assay: Een methode die afhankelijk is van koperreductie en kleurimetrische detectie.
  • Lowry Assay: Een goed gevestigde benadering die gebruikmaakt van eiwit-koperinteracties.

Hoe de Calculator te Gebruiken

Volg deze stappen om de eiwitconcentratie te berekenen:

  • Kies de meetmethode (A280, Bradford, BCA of Lowry).
  • Voer de vereiste waarden in, zoals absorptie, verdunningsfactor en extinctiecoëfficiënt (indien nodig).
  • Als u een standaardcurve-methode gebruikt (Bradford, BCA of Lowry), voer dan de curveparameters in.
  • Klik op de knop "Bereken" om het concentratieresultaat te krijgen.

Voordelen van het Gebruik van de Calculator

  • Bespaar tijd door concentratieberekeningen te automatiseren.
  • Ondersteunt meerdere meetmethoden voor flexibiliteit.
  • Bevat een verdunningscalculator voor het voorbereiden van specifieke concentraties.
  • Vermindert menselijke fouten bij handmatige berekeningen.

Veelgestelde Vragen

1. Hoe nauwkeurig is de Absorptie (A280) methode?

De A280-methode is over het algemeen nauwkeurig voor pure eiwitten, maar kan worden beïnvloed door verontreinigingen zoals nucleïnezuren.

2. Kan ik de Bradford Assay voor alle eiwitten gebruiken?

De Bradford Assay werkt goed voor de meeste eiwitten, maar kan variabele resultaten geven afhankelijk van de eiwit samenstelling.

3. Wat is het voordeel van de BCA Assay?

De BCA-methode is beter compatibel met detergenten en heeft een breder lineair bereik dan Bradford.

4. Hoe kies ik de juiste extinctiecoëfficiënt voor A280?

Gebruik gepubliceerde waarden voor bekende eiwitten, of bereken de extinctiecoëfficiënt op basis van de aminozuursamenstelling.

5. Waarom heb ik een verdunningsfactor nodig?

Als uw monster is verdund vóór de meting, moet u de berekende concentratie vermenigvuldigen met de verdunningsfactor om de juiste eindconcentratie te verkrijgen.